食品安全

Food Safety

干貨分享-食源性致病菌檢測
作者:博日科技 時間:2018-11-08 13:22:49 瀏覽數:1848

 

 

 

【民以食為天,食以安為先。隨著食品產業的快速發展,食源性疾病已成為日益嚴重的全球性公共衛生問題之一,也是食品安全問題的首要重點。根據WHO報告,估計每年全世界有6億人(幾乎每10人中就有1人)因食用受污染的食品而患病,并有42萬人死亡。5歲以下兒童的風險尤其高,每年有12.5萬兒童死于食源性疾病。目前熒光 PCR 法由于其靈敏度和特異性高、無污染、重復性好等眾多優點在食源性致病病原體的檢測方面得到廣泛應用。食源性疾病是通過攝食進入人體內的各種致病因子引起的、通常具有感染性質或中毒性質的一類疾病。包括常見的食物中毒、腸道傳染病、人畜共患傳染病、寄生蟲病以及有毒有害物質所引起的疾病。致病因素可分為細菌性、病毒性、寄生蟲、化學系和物理性等,其中以細菌性食源性疾病最為常見】

 

 

用于食品檢測的各種方法

 食源性致病菌病原體檢測常用方法有病原體培養法、免疫學方法、核酸檢測等。病原體培養法檢測周期長,靈敏度低,操作復雜,而免疫學方法抗體制備繁瑣,且病原蛋白易受食品加工過程影響,特異性差,靈敏度低,而實時熒光 PCR 法由于其靈敏度高、特異性強、污染少、重復性好等優點在食源性致病病原體的定性和定量檢測方面得到廣泛應用。 我國出入境檢驗檢疫行業標準 SNT1870‐2007 中規定對食品中致病菌檢測方法使用熒光 PCR 方法,SN/T1632.3‐2005 中要求使用熒光 PCR 方法檢測奶粉中阪崎腸桿菌檢驗方法。目前熒光 PCR 法已在副溶血性弧菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和和阪崎腸桿菌等檢測中得到應用。

常見的細菌性食源性疾病病原體、高風險食物和其所致疾病

 

 

食源性致病菌檢測解決方案:

 特點

Ø 高靈敏度:符合我國出入境檢驗檢疫行業標準的檢出要求

Ø 高特異性:以特異性基因片段設計引物和探針,結果可靠

Ø 操作簡便、耗時短:試劑采用預混合形式,組分少,操作快速

Ø 開放試劑,可用于市面上各種定量PCR儀,推薦使用博日公司的定量PCR


v 實驗數據

1.博日沙門氏菌核酸檢測試劑盒基于Real-Time PCR技術,針對沙門氏菌特異性基因設計特異性引物和Taqman探針,主要用于對食品樣品(肉制品、水果等)、水樣、糞便中沙門氏菌核酸(DNA)定性檢測,符合國內食品安全檢測沙門氏菌的檢測要求及相應國標(GB/T 4789.4-2016),試劑盒的檢測靈敏度為10CFU。

 應用案例:

沙門氏菌核酸檢測實驗結果示例圖:

 

         

 

圖1. 熒光PCR擴增曲線                             圖2. 熒光PCR標準曲線



 結果:根據以上熒光曲線圖顯示,沙門氏菌核酸檢測試劑盒檢測梯度濃度樣本時,呈明顯的梯度形式,且重復性好,靈敏度高,標準曲線各項指標均達標。


2博日大腸桿菌O157核酸檢測試劑盒基于Real-Time PCR技術,針對大腸桿菌O157特異性基因設計特異性引物和Taqman探針,用于對食品樣品(肉制品、水果等)中大腸桿菌O157核酸(DNA)定性檢測,符合國內食品安全檢測大腸桿菌的檢測要求及相應國標(GB 4789.36-2016),試劑盒的檢測靈敏度為50 CFU


應用案例:


梯度濃度大腸桿菌溶于溶劑中,模擬食品樣本檢測,進行梯度檢測。


      

 

   圖1. 熒光PCR擴增曲線                    圖2. 熒光PCR標準曲線

 

 

結果:根據以上熒光曲線圖顯示,大腸桿菌O157核酸檢測試劑盒檢測梯度濃度樣本時,呈明顯的梯度形式,且重復性好,靈敏度高,標準曲線各項指標均達標。


3. 博日阪崎腸桿菌的熒光PCR檢測試劑盒采用高技術樹脂吸附技術,可有效避免乳品特有高蛋白以及脂肪對PCR反應的抑制以及由此引起的假陰性。 符合目前國內乳品行業阪崎腸桿菌檢測要求以及相關標準(SN/T1632.3-2005),專門檢測奶粉產品中阪崎腸桿菌核酸,最小檢測靈敏度可達到101-1010拷貝級別。

 

 應用案例:

檢測線性范圍101-1010,線性范圍標準梯度樣本線性相關性r=1.00


 阪崎腸桿菌核酸檢測實驗結果示例圖:

 


 樣本同一實驗

 

 

 

檢測試劑盒

 

 


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